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從兔單抗到重組兔單抗

發(fā)布時間：2018-09-21 瀏覽次數(shù)： 加載中...

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前言：自 1998 年起，Abcam 始終致力于為全球的科學家提供各種優(yōu)質生物試劑和試劑盒。為了滿足不斷變化的科研需求，Abcam投入大量人力物力開發(fā)新技術。十多年前，醫(yī)學家朱偉民一手打造出了 Abcam 的 RabMAb® 抗體平臺。該平臺出品的抗體現(xiàn)已廣泛用于全球的研究、診斷和治療領域。

眾所周知，RabMAb 一抗的制備有別于常規(guī)的利用小鼠或大鼠的生產(chǎn)方法，而是利用了獨特的專利技術“兔單克隆抗體生產(chǎn)方法”。

其基本原理與制備小鼠單克隆抗體相似：

專利的兔融合伴侶細胞能與兔 B 細胞融合，形成兔雜交瘤細胞——真正的兔-兔雜交瘤細胞。隨后篩選雜交瘤細胞以選擇具有特異和敏感的抗原識別能力的克隆體，并采用多種方法鑒定抗體（參見下圖的 RabMAb 生產(chǎn)工藝）。

兔與其他物種，如小鼠、大鼠、雞相比，擁有獨特的免疫系統(tǒng)。它有很大的B細胞反應庫（repertoire），這意味著它們可產(chǎn)生多樣的抗體。

兔免疫系統(tǒng)的親和力優(yōu)化機制也比小鼠和其他嚙齒動物更有效?？衫猛卯a(chǎn)生這些高親和力的抗體，甚至是針對在小鼠中不具有免疫原性的抗原也能產(chǎn)生抗體。平均而言，兔單克隆抗體對靶抗原的親和力是小鼠單克隆抗體的 10-100 倍。由于具有更大且更多樣的 B 細胞反應庫，兔抗體在區(qū)分諸如表位變異（如修飾）、突變和構象變化等細微差別方面也更具優(yōu)勢。

然而無論基于動物來源，還是基于雜交瘤的抗體制備過程，都可能會面臨批次差異這樣的問題：有的時候小鼠抗體最初表現(xiàn)良好，但在后續(xù)批次中卻無法產(chǎn)生相同的結果。

這可能是由于雜交瘤細胞系漂移、基因丟失或突變。盡管多克隆抗體在生命科學研究中始終發(fā)揮著重要作用，但批間差異會更加頻繁地出現(xiàn)。

為了向用戶提供具有優(yōu)異靈敏度和最高一致性的抗體，abcam設計了 RabMAb 兔單抗的重組版本。這種組合可提供多種獨特優(yōu)勢。

重組抗體是通過將免疫特異性重鏈和輕鏈抗體克隆到高產(chǎn)的哺乳動物表達載體中而制成的。將得到的載體引入到表達宿主（如細菌、酵母或哺乳動物）中，用于生產(chǎn)高質量的功能性抗體?？稍隗w外通過克隆 ScFV 或 Fab 形成 Ig 框架來構建重組抗體，也可從現(xiàn)有的雜交瘤細胞中產(chǎn)生重組抗體。在基于雜交瘤的重組抗體制備中，常用的是小鼠、大鼠和兔模型。然而，只要有適當?shù)墓押塑账嵋锟捎?，可從任何物種中開發(fā)重組抗體。

重組抗體的優(yōu)勢

與傳統(tǒng)的單克隆抗體和多克隆抗體相比，重組抗體具有若干優(yōu)點：

更高的一致性和重復性

因為重組抗體是由一組獨特的基因發(fā)展而來的，所以抗體生產(chǎn)是可控且可靠的?？梢员苊怆s交瘤細胞制備中的一些問題，如基因丟失、基因突變和細胞株漂移等。這使得抗體的批次間差異非常小，從而為您提供高度可重復的結果。

更高的靈敏度和特異性

利用重組技術，更容易通過抗體工程提高抗體特異性和靈敏度。所需克隆的選擇過程發(fā)生在雜交瘤細胞和重組克隆階段，這使我們能夠選擇最優(yōu)的抗體質量。

易于擴展

隨著抗體基因的分離，與傳統(tǒng)單克隆技術相比，抗體表達能夠以任何規(guī)模在更短的時間內(nèi)進行。這意味著我們可以在數(shù)周而非數(shù)月內(nèi)產(chǎn)生定制抗體。

無動物高通量生產(chǎn)

一旦分離出產(chǎn)生抗體的基因，就可以實現(xiàn)無動物體外生產(chǎn)。

當前，abcam擁有超過 10,000 種重組 RabMAb 抗體，其中很多都是經(jīng)過KO敲除驗證的，同時保證了檢測結果的一致性和重復性。

而且重組 RabMAb 抗體還在關鍵應用（WB、IHC、ICC/IF、IP 和流式細胞術）和物種（人、小鼠和大鼠）中進行了驗證，可以滿足絕大多數(shù)科研工作者的需求。